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设计模型时是否添加标签的考量是什么?

我们在设计转基因或敲入91香蕉视频导航 的时候,如果表达的目标基因跟小鼠内源基因相同,或目前市面上没有较好的抗体来检测目的蛋白的表达时,可在设计载体时加入Tag。有多种标签可选择用于标记目的蛋白,常用的小标签有HA、Flag、Myc、His等,可用于蛋白检测、免疫沉淀等生化应用;常用的荧光蛋白有GFP、RFP、mCherry 、tdTomato等,可用于蛋白定位(包括亚细胞定位)和活细胞成像等(需要注意,通过2A肽段编码序列或IRES间隔的荧光蛋白不与目的基因表达产物形成融合蛋白,因此不能起到标签的效果,不能反应蛋白的亚细胞定位或作为标签使用,仅能标示目的基因的时序性和组织特异性表达)。需要注意的是,Tag加入后可能会对基因的表达或蛋白的功能产生无法预期的影响,一般来说蛋白标签分子越大,影响可能会越大。



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